钟基因hClock、hBmal1在结直肠肿瘤中的 表达

 目的 探讨人类生物钟基因hClock及hBmal1在不同Dukes分期结直肠肿瘤中的表达,研究它们的表达与结直肠肿瘤侵袭及转移的关系。方法 采用原位杂交法检测结直肠肿瘤与相应瘤旁组织中hClock及hBmal1基因mRNA的表达,并采用免疫组织化学检测相应标本中hClock基因蛋白产物（CLOCK蛋白）的表达。结果 32例结直肠肿瘤中hClock mRNA阳性表达率93.75%（30／32）,中或强阳性表达率78.13%（25／32）;hBmal1 mRNA阳性表达率71.88%（23／32）,中或强阳性表达率40.63%（13／32）。两者的中或强阳性率与Dukes分期相关（P<0.05）。阳性表达的肿瘤组织对应肿瘤旁组织hClock及hBmal1基因mRNA的弱阳性表达。CLOCK蛋白中或强阳性表达率87.50%（28／32）,瘤旁组织中CLOCK蛋白弱阳性率93.75%（30／32）（P<0.01）。结论 hClock、hBmal1基因与结直肠肿瘤的发生、发展及侵袭、转移有一定的相关性。     

节律基因hClock及hBmal1对胃癌化疗敏感性的影响

  目的  探讨节律基因hClock、hBmal1对胃癌细胞SGC-7901化疗敏感性的影响。  方法  体外持续黑暗条件下培养SGC-7901,用实时定量PCR法检测两种主要的节律基因hClock、hBmal1在SGC-7901中不同时间点的表达,分别在节律基因hClock、hBmal1表达的高峰及低谷给予化疗药物多西他赛,CCK-8法检测化疗药物对肿瘤细胞的抑制率。  结果  实时定量CR结果显示节律基因hClock、hBmal1在胃癌细胞SGC-7901中不同时间点表达不同,存在时相性波动,表达高峰在20:00,而表达低谷在08:00。CCK-8法显示在节律基因hClock、hBmal1表达高峰时,多西他赛对肿瘤细胞的抑制率低于其在低谷时的抑制率。  结论  节律基因hClock、hBmal1过表达可以降低胃癌细胞SGC-7901对多西他赛的敏感性。      

XAGE-1基因在肺癌组织中的表达及其与临床特点的关系

背景与目的 研究证实XAGE-1作为一种癌胚抗原在多种肿瘤中高表达.本研究旨在探讨XAGE-1基 因在肺癌组织中的表达水平及其与临床特点的关系.方法 肺癌患者85例,提取肺癌组织和癌旁组织总RNA,巢式 PCR反应扩增XAGE-1四种剪接体基因,分析基因表达情况及其与临床特点的关系.结果 32.94%(28/85)肺癌患者 癌组织阳性表达XAGE-1基因,在各种类型肺癌中,59.46%(22/37)的腺癌与21.74%(5/23)鳞癌患者癌组织阳性表 达XAGE-1基因;XAGE-1b基因的表达与肺癌病理类型有相关性(P<0.05),腺癌阳性表达率明显高于鳞癌,而与肺 癌的性别、年龄及临床分期无相关性(P>0.05).结论 XAGE-1基因在肺癌尤其腺癌组织中高表达,该基因可以作 为免疫治疗的靶基因.     

SATB1基因在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的 检测结直肠癌组织中特异AT序列结合蛋白1(special AT-rich sequence binding protein,SATB1)的表达情况与结直肠癌生物学行为的相关性.方法 采用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测39例结直肠癌及相应癌旁对照组织中SATB1 mRNA的表达,采用免疫组织化学方法检测39例结直肠癌及相应癌旁对照组织中SATB1的表达,分析SATB1基因表达与患者临床病理因素的相关性.结果 癌组织中SATB1蛋白表达阳性率为69.23％(27/39),SATB1 mRNA表达量为(1.178±0 644),均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.05).而SATB1蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率与有无淋巴结转移显著相关(P＜0.01),有淋巴结转移其SATB1蛋白阳性表达率为100％,与肿瘤浸润深度和临床TNM分期密切相关(P＜0.05).SATB1 mRNA的表达与肿瘤浸润深度、是否淋巴结转移显著相关(P＜0.01),与肿瘤临床分期密切相关(P＜0.05).结论 SATB1基因在癌组织中的表达较癌旁组织显著增高表明其可能与结直肠癌的发生有关,而SATB1高表达预示结直肠癌恶性程度高临床分期较晚,可能存在淋巴结转移,预后不良,因此检测SATB1表达可作为临床上筛选结直肠癌高危转移患者、制定治疗方案和判断预后的一个新指标,并有望成为新的治疗靶点.     

人肺癌组织端粒酶活性与p16基因二者相关性探讨

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中端粒酶活性与p16基因的相关性及二者与肺癌发生发展的关系.方法:肺癌标本48例,12例癌旁组织,7例非肿瘤病例的正常肺组织.以Telomerase PCR ELISA检测标本端粒酶活性,以RT-PCR的方法检测p16基因mRNA转录情况,以免疫组化方法检测组织标本p16蛋白表达.结果:1)肺癌组织标本36/48(75.00%)和1例癌旁组织检出端粒酶活性.2)48例NSCLC组织中32例进行了p16 mRNA及蛋白表达检测.16/32(50.00%)检测到p16mRNA转录,7例正常组织中均检测到p16 mRNA转录.NSCLC组织标本中17/32(53.13%)未检测到p16蛋白表达,7例正常肺组织中均检测到p16蛋白表达.3)24例端粒酶阳性NSCLC组织中15例p16 mRNA表达缺失,8例端粒酶阴性的NSCLC组织中仅1例p16mRNA表达缺失.相关系数为-0.433,P=0.013,具有显著负相关.结论:端粒酶、p16基因在NSCLC的发生发展中起重要作用,端粒酶活性有望成为预测肿瘤发生、肿瘤诊断的良好指标.端粒、端粒酶与p16基因可能成为抗肿瘤治疗的新靶点.     

Testin基因在结直肠癌组织中的表达及临床意义

背景与目的:人类Testin基因是一个定位于染色体7q31.2的候选抑癌基因.本实验研究人结直肠癌中候选抑癌基因Testin的表达,并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系.方法:应用RT-PCR和免疫组化SP法检测60例患者结直肠癌组织及对应正常组织(距肿瘤15 cm以上)中Testin的表达.同时分析Testin的表达与患者临床病理特征的关系.结果:结直肠癌组织中Testin mRNA的表达水平显著低于正常组织(P<0.01);免疫组化结果显示Testin在31.7%(19/60)的结直肠癌组织中呈阳性,而在正常组织中有86.7%(52/60)阳性(P<0.01).统计分析结果发现,Testin蛋白与mRNA的表达与结直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤部位无关(P>0.05),而与肿瘤浸润深度、分化程度、Dukes分期、T分期、有无淋巴结转移和远处转移有关(P<0.05).浸润越深、分化程度越低、Dukes分期越晚、T分期越晚、有淋巴结转移和有远处转移的癌组织的Testin表达明显降低;Testin蛋白与mRNA的表达呈显著正相关(r=0.75,P<0.05).结论:Testin在结直肠癌中的表达量显著下降,可能与结直肠癌的浸润、分化和转移相关,提示Testin基因表达下调可能对结直肠癌的发生、发展具有重要作用.可能成为判断结肠癌预后和浸润转移的生物学指标.     

非小细胞肺癌Survivin和Skp2的表达及其临床意义

目的 检测Survivin和Skp2蛋白在非小细胞肺癌中的表达,探讨其相互关系及临床意义.方法 用实时定量PCR的方法检测30例非小细胞肺癌组织及其对应的癌旁组织中survivin mRNA的表达,应用免疫组织化学法检测50例非小细胞肺癌组织中Survivin和Skp2的表达,统计Survivin与病理特征及Skp2的关系.结果 76.7%(23/30)肿瘤组织survivin mRNA表达量明显高于对应的癌旁组织.Survivin蛋白在癌组织的阳性表达率(74.0%)显著高于癌旁组织(16.7%),χ2=25.9,P<0.001.Skp2在非小细胞肺癌组织中的阳性表达率(70.0%)也显著高于癌旁组织(20.0%),χ2=18.8,P<0.001).Survivin表达与非小细胞肺癌的病理类型、分化程度、肿瘤分期以及是否有淋巴结转移无统计学意义的相关性(P>0.05).Survivin表达与Skp2表达呈正相关(χ2=8.32,P<0.05).结论 Survivin在肺癌组织中高表达,其阳性表达率与肿瘤病理类型、肿瘤分期、细胞分化程度和淋巴结转移无明显相关性,与Skp2表达呈正相关.     

食管鳞状细胞癌中CDH1基因启动子区甲基化状态与β-catenin异质表达的相关性

目的:研究食管鳞状细胞癌(Esophageal Squamous Cell Cancer,ESCC)中CDH1(cadherin 1)基因的甲基化状态,探讨其与Wnt中心因子β-catenin表达及与食管鳞癌发生的关系.方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)及RT-PCR的方法检测91例食管鳞癌中CDH1基因的甲基化状态及其mRNA表达情况,应用免疫组织化学的方法检测β-catenin蛋白的表达情况,并分析与临床病理参数间的关系.结果:在91例食管鳞癌中,有72例CDH1基因发生了甲基化,甲基化率为79.1%,明显高于癌旁非肿瘤组织(P＜0.01);癌组织中CDH1基因的高甲基化与肿瘤患者的临床分期相关,与病理分级无关;癌组织中该基因mRNA的阳性表达率42.9%,明显低于癌旁非肿瘤组织(97.8%,P＜0.01);癌及癌旁组织中β-catenin蛋白的异质表达率分别为89.0%和24.2%,差异均有统计学意义(P＜0.01):癌组织中CDH1基因mRNA表达及β-catenin蛋白的异质表达均与该基因的甲基化状态明显相关(P＜0.05).结论:CDH1基因启动子区甲基化在食管鳞癌中频繁发生,该基因的高甲基化状态可能是引起食管鳞癌发生的分子机制之一,并有可能通过Wnt/β-catenin信号传导通路发挥作用.     

凋亡相关基因产物Fas/APO-1和Bcl-2蛋白在肺癌组织中的表达及意义

目的　探讨凋亡相关基因Fas/APO1和Bcl2在肺癌发生发展中的作用。方法　采用免疫组织化学方法对65例肺癌组织和46例远离肺癌正常肺组织Fas/APO1和Bcl2蛋白的表达进行检测。结果　肺癌组织Fas/APO1蛋白阳性表达率(56.92%)明显低于正常肺组织的阳性表达率(82.61%)(P<0.01),而Bcl2蛋白阳性表达率(46.15%)明显高于正常肺组织的阳性表达率(6.52%)(P<0.01)。结论　Fas/APO1与Bcl2基因可能参与了肺癌的发生和发展     

结直肠癌组织趋化因子受体CXCR4表达及其与淋巴结和肝转移相关性的探讨

目的:研究趋化因子受体CXCR4在结直肠癌组织中的表达,探讨其与淋巴结、肝转移及预后的关系.方法:应用免疫组化方法(SP法)检测20例正常结直肠黏膜组织、64例结直肠癌组织、34例区域淋巴结转移癌组织以及18例肝转移组织CXCR4表达情况.同时应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其mRNA在4株大肠癌细胞株中的表达.结果:正常结直肠黏膜、结直肠癌、区域淋巴结转移癌以及肝转移组织中CXCR4阳性率分别为15.0%、51.6%、72.2%和73.5%;转移组织阳性表达率明显高于原发肿瘤.CX-CR4 mRNA高表达于2株人大肠癌细胞株.结直肠癌组织CXCR4阳性表达率与Duke临床分期、淋巴结转移和肝转移密切相关,P<0.05,而与患者年龄、性别、肿瘤所在部位及病理分化程度无关.CXCR4阳性表达组3年生存率明显低于阴性表达组,P<0.05.结论:CXCR4阳性表达与结肠直肠癌的淋巴结、肝转移有关,有助于预后判断.