黄芩素激活核转录因子Nrf2拮抗肝毒性的研究

目的研究黄芩素(Baicalein,BAI)对核转录因子Nuclear factor erythroid 2-related factor 2(Nrf2)的转录激活,以及对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)、乙醇(ethanol)和对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的人正常肝L-02细胞毒性的拮抗作用。方法在肝L-02细胞中,采用瞬时转染报告基因实验检测不同浓度黄芩素对Nrf2转录激活的影响。在L-02细胞上分别用APAP(10 mmol·L-1)、CCl4(10 mmol·L-1)、Ethanol(100 mmol·L-1)诱导肝细胞毒性。黄芩素1、10、25、50、100μmol·L-1分别与细胞预孵15 min后,加入上述肝毒性物质,48 h后采用MTT法检测细胞存活率。结果与对照组比较,黄芩素(25、50μmol·L-1)能明显提高Nrf2的转录激活(P<0.01,P<0.05)。与对照组比较,3种肝毒性物质均能明显降低细胞存活率(P<0.01),而黄芩素能剂量依赖性地提高给予APAP、CCl4和Ethanol后降低的L-02细胞存活率(P<0.01)。结论黄芩素可以诱导重要的抗氧化核转录因子Nrf2的转录激活,这可能是黄芩素拮抗外源性肝毒性物质APAP、CCl4和Ethanol诱导的L-02肝细胞毒性的机制之一。     

8-溴-7-甲氧基白杨素诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡

目的观察8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxy-chrysin,BrMChR)诱导人胃癌(SGC-7901)细胞凋亡作用。方法体外培养SGC-7901细胞,MTT法测定细胞存活率;PI染色流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率;DNA琼脂糖凝胶电泳观察梯形条带。结果MTT测定结果显示,BrMChR明显抑制SGC-7901细胞增殖,呈浓度依赖性,其IC50为2.6μmol·L-1,BrMChR的效价强度约是白杨素(ChR,IC50为16.5μmol·L-1)的8倍,约为氟尿嘧啶(5-FU,IC50为7.7μmol·L-1)的3倍。PI染色FCM分析发现BrMChR(1.25、5.00、20.00μmol·L-1)作用SGC-7901细胞48h的细胞凋亡率分别是19.8%±0.2%,36.8%±1.9%,45.5%±3.5%,BrMChR(1.25μmol·L-1)处理的细胞凋亡率较ChR(20.00μmol·L-1)的凋亡率(12.9%±1.5%)高;DNA琼脂糖凝胶电泳观察BrMChR(20.00μmol·L-1)作用24h和48h后SGC-7901细胞的基因DNA呈现典型梯形条带,且能被PPARγ阻断剂GW9662(10.00μmol·L-1)预孵育减弱。结论BrMChR可能部分通过活化PPARγ诱导SGC-7901细胞凋亡。     

硼替佐米对转基因小鼠原代肝细胞HBV的抑制作用

目的利用HBV转基因小鼠原代肝细胞评价蛋白酶体抑制剂硼替佐米的抗病毒效果。方法采用改良的两步灌流法分离HBV转基因小鼠原代肝细胞;分别采用ELISA和荧光定量PCR法检测HBsAg和HBV-DNA的水平;采用MTT法观察不同浓度的硼替佐米对HBV转基因小鼠原代肝细胞和HepG2.2.15细胞的毒性,观察其作用24 h后细胞培养上清中病毒学指标的变化。结果分离的原代肝细胞纯化后活细胞占0.90,HBsAg和HBV-DNA在5 d内均能稳定表达。药物作用24 h后,MTT结果显示260μmol·L-1及以下浓度的硼替佐米对原代肝细胞无明显毒性,但对HepG2.2.15细胞显示较强的细胞毒性,其最大无毒浓度为12.5 nmol·L-1。药物在0.026μmol·L-1～26μmol·L-1的浓度范围内对转基因小鼠原代肝细胞HBsAg和HBV-DNA有明显抑制作用。结论硼替佐米在体外对HBV有抑制作用;HBV转基因小鼠原代肝细胞可用于抗肿瘤药物的抗HBV活性研究。     

黄芩素通过调控糖酵解及谷氨酰胺代谢抑制肝癌细胞能量代谢

摘要：目的:探讨黄芩素对肝癌细胞能量代谢能力的影响及机制。方法:不同人肝癌细胞SMMC-7721、HepG2中给予不同浓度的黄芩素,通过检测细胞ATP含量、乳酸含量、谷氨酰胺代谢评价黄芩素对肝癌细胞增殖及能量代谢的影响,同时分别采用siRNA干扰己糖激酶2（HK2）及溶质载体家族1A5（SLC1A5）表达后,考察黄芩素对肝癌细胞增殖及能量代谢能力的影响。结果:黄芩素可以浓度、时间依赖性的抑制肝癌细胞活力,SMMC-7721细胞24,48,72 h处理后的半数抑制浓度(IC50)分别为26.07,20.9,18.7μmol·L-1,HepG2细胞24,48,72 h处理后的IC50分别为27.8,24.5,22.6μmol·L-1。与对照组比较,20μmol·L-1黄芩素可明显降低SMMC-7721和HepG2细胞对葡萄糖的消耗及乳酸含量（P<0.05）,同时显著降低SMMC-7721和HepG2细胞中谷氨酰胺含量（P<0.05）。与敲除HK2的肝癌细胞联合培养72 h后,与对照组比较,20μmol·L-1黄芩素仍可降低细胞能量代谢水平（P<0.05）,但对肝癌细胞的糖酵解能力无显著影响。与敲除SLC1A5后的肝癌细胞联合培养72 h后,与对照组比较,20μmol·L-1黄芩素能显著降低肝癌细胞的能量代谢及糖酵解能力（P<0.05）。在无谷氨酰胺环境下,20μmol·L-1黄芩素对于敲除HK2肝癌细胞的能量代谢调节作用与siRNA HK2组无显著差异。结论:黄芩素可抑制肝癌细胞的增殖,降低肝癌细胞的能量代谢水平,其作用机制与其同时参与肝癌细胞糖酵解及谷氨酰胺代谢相关。     

高良姜素对非小细胞肺癌A549细胞SIRT1/mTOR通路及放射敏感性的影响

摘要：目的:探讨高良姜素对非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞沉默信息调节因子1（SIRT1）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路及放射敏感性的影响。方法:体外培养NSCLC A549细胞,细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测不同浓度(10,20,40,60,80,100μmol·L-1)高良姜素处理的A549细胞的增殖抑制率;将A549细胞经不同剂量（0,1,2,4,6,8 Gy）放射处理,并设置各剂量与35μmol·L-1高良姜素联用组,克隆形成实验观察高良姜素的放射增敏作用;将A549细胞分为高良姜素+放射线组(35μmol·L-1+6 Gy)、高良姜素组(35μmol·L-1)、放射线组（6 Gy）及对照组,流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法检测增殖蛋白细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、细胞增殖核抗原（Ki67）、凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-3、Caspase-9及STRT1/mTOR通路蛋白SIRT1、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、磷酸化AMPK（p-AMPK）、磷酸化mTOR（p-mTOR）、mTOR的表达。结果:与对照组比较,随着高良姜素浓度的增加,A549细胞增殖抑制率逐渐增加（P<0.05）;与各剂量射线单独处理的A549细胞相比,35μmol·L-1高良姜素+各剂量射线处理的A549细胞存活分数降低（P<0.05）,辐射增敏比（SER）=1.522;与对照组比较,高良姜素组、放射线组、高良姜素+放射线组A549细胞凋亡率、Caspase-3、Caspase-9、p-AMPK/AMPK蛋白表达显著升高,CyclinD1、Ki67、SIRT1、p-mTOR/mTOR蛋白表达显著降低（P<0.05）;与高良姜素组、放射线组比较,高良姜素+放射线组A549细胞凋亡率、Caspase-3、Caspase-9、p-AMPK/AMPK蛋白表达显著升高,高良姜素+放射线组CyclinD1、Ki67、SIRT1、p-mTOR/mTOR蛋白表达显著降低（P<0.05）。结论:高良姜素可能通过调控SIRT1/mTOR通路影响A549细胞的增殖凋亡及放射敏感性,可能是治疗NSCLC的潜在药物。     

6,8-二-三氟甲基-5-羟基-7-乙酰基白杨素的抗肿瘤作用

目的　研究 6 ,8 二 三氟甲基 5 羟基 7 乙酰基白杨素的抗肿瘤作用及机制。方法　采用MTT比色法检测白杨素及白杨素乙酰化、卤化、三氟甲基化衍生物体外抗肿瘤活性 ;小鼠Lewis肺癌移植瘤模型观察目标化合物 (6 ,8 二 三氟甲基 5 羟基 7 乙酰基白杨素 )体内抗肿瘤作用 ;PI染色流式细胞术分析 6 ,8 二 三氟甲基 5 羟基 7 乙酰基白杨素对人胃癌(SGC 790 1 )细胞周期的影响。结果　白杨素及白杨素乙酰化、卤化、三氟甲基化衍生物对体外培养人胃癌 (SGC 790 1 )细胞 ,人急性粒细胞性白血病 (HL 6 0 )细胞和人结肠癌 (HT 2 9)细胞具有抑制增殖作用 ;以 6 ,8 二 三氟甲基 5 羟基 7 乙酰基白杨素作用最强 ,其对SGC 790 1细胞 ,HT 2 9细胞和HL 6 0细胞的IC50 分别是 2 5 1 ,1 96和 0 1 8μmol·L-1 。 6 ,8 二 三氟甲基 5 羟基 7 乙酰基白杨素对小鼠Lewis肺癌皮下移植原发瘤及自发性肺转移具有抑制作用 ,呈剂量依赖关系。6 ,8 二 三氟甲基 5 羟基 7 乙酰基白杨素 (1～ 2 μmol·L-1 )能使SGC 790 1细胞周期阻滞于G1 期。结论　 6 ,8 二 三氟甲基 5 羟基 7 乙酰白杨具有抗肿瘤作用 ,其机制可能与使细胞周期G1 期阻滞相关     

L-肌肽对鱼藤素诱导SH-SY5Y细胞神经毒性的保护作用

目的研究L-肌肽是否能通过抗氧化活性降低鱼藤素导致的神经毒性。方法 SH-SY5Y细胞在L-肌肽(1、10、20、40、60、80、100 mmol·L~(-1))中培养24 h,CCK-8法测定细胞存活率。30 mmol·L~(-1) L-肌肽、20μmol·L~(-1)鱼藤素、20μmol·L~(-1)鱼藤素与30 mmol·L~(-1) L-肌肽作用于SH-SY5Y细胞24 h,AO/EB法检测细胞形态和凋亡情况。8μmol·L~(-1)鱼藤素、8μmol·L~(-1)鱼藤素与3 mmol·L~(-1) L-肌肽、8μmol·L~(-1)鱼藤素与30 mmol·L~(-1) L-肌肽、20μmol·L~(-1)鱼藤素、20μmol·L~(-1)鱼藤素与3 mmol·L~(-1) L-肌肽、20μmol·L~(-1)鱼藤素与30 mmol·L~(-1) L-肌肽、50μmol·L~(-1)鱼藤素、50μmol·L~(-1)鱼藤素与3 mmol·L~(-1) L-肌肽、50μmol·L~(-1)鱼藤素与30 mmol·L~(-1) L-肌肽作用于SH-SY5Y细胞24 h,CCK-8法检测细胞的增殖情况;双染流式细胞术检测细胞凋亡率;DCFH-DA流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)水平。结果 20μmol·L~(-1)鱼藤素与30 mmol·L~(-1) L-肌肽共作用于细胞后,细胞抑制率降低9.07%,早期凋亡的细胞数减少,早期凋亡率降低9.35%,总凋亡率降低10.7%,ROS水平低于20μmol·L~(-1)鱼藤素组,结果差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 L-肌肽能有效降低鱼藤素诱导SH-SY5Y细胞的神经毒性,保护细胞,其机制可能与降低氧化应激水平相关。     

Survivin在PC12细胞对抗化学性缺氧损伤中的作用

目的探讨存活素(survivin)在PC12细胞对抗氯化钴(CoCl2)诱导损伤中的作用。方法应用不同浓度的CoCl2处理PC12细胞不同时间,建立化学性缺氧诱导PC12细胞损伤的实验模型。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Western-blot法检测CoCl2诱导缺氧与survivin表达间的量效(200～1000μmol·L-1)和时效(0～48h)关系。结果CoCl2可明显抑制PC12细胞的存活率,且呈浓度和时间依赖性。应用不同浓度CoCl2处理PC12细胞24h,在200～600μmol·L-1浓度范围内,呈浓度依赖性地促进survivin表达,600μmol·L-1CoCl2诱导survivin表达达高峰,超过此浓度,则随着CoCl2浓度的增加,survivin表达逐渐下降,CoCl2浓度达1000μmol·L-1时,survivin基本不表达;应用600μmol·L-1CoCl2处理PC12细胞,在0～36h时间范围内,呈时间依赖性地促进PC12细胞survivin的表达,但随着处理时间的延长,survivin的表达逐渐下降;加入2μmol·L-1Hsp90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG),不仅可以降低600μmol·L-1 CoCl2诱导的survivin高表达,而且加重了600μmol·L-1 CoCl2对PC12细胞的损伤作用,使细胞存活率降低。结论survivin表达上调可能是PC12细胞对抗化学性缺氧损伤的内在防御机制之一。     

白杨素对人白血病细胞柔红霉素化疗敏感性及PI3K/Akt通路的影响

摘要：目的:研究白杨素联合柔红霉素诱导体外培养的急性粒细胞性白血病细胞株（HL-60）的细胞凋亡作用,通过其对磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路的活化,增加HL-60对柔红霉素的敏感性。方法:用MTT法测定对照组、白杨素组(20μmol·L-1)、柔红霉素组(0.5μg·ml-1)和白杨素(20μmol·L-1)+柔红霉素(0.5μg·ml-1)组对HL-60细胞的抑制率,观察各组HL-60细胞形态变化,并用吖啶橙和溴化乙锭（AO/EB）双荧光法观察细胞凋亡情况;用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测白杨素与柔红霉素联用对HL-60细胞PI3K相关基因S期激酶相关蛋白2（Skp-2）、抑癌基因P27、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达的影响;用蛋白质免疫印迹法（Western Blotting）方法检测白杨素与柔红霉素联用对HL-60细胞PI3K相关蛋白Skp-2、P27、Bcl-2和Bax表达的影响。结果:白杨素与柔红霉素联用能显著增强HL60对柔红霉素的化疗名感性,降低HL60细胞存活率,增加细胞凋亡,下调Skp-2、Bcl-2 mRNA及蛋白表达,上调P27 mRNA及蛋白表达,与单药组比较差异有统计学意义（P<0.05）;而Bax mRNA及蛋白表达变化不明显（P>0.05）。结论:白杨素可以有效靶向诱导HL-60肿瘤细胞凋亡,并通过PI3K/Akt信号通路增加HL-60对柔红霉素的化疗敏感性。     

皮质酮损伤培养的海马神经细胞并促进其电压依赖性钙内流(英文)

目的:研究皮质酮(Cor)对原代培养海马神经细胞存活和海马神经细胞电压依赖性钙通道(VDCC)的影响。方法:原代海马神经细胞存活率测定用MTT比色法。海马神经细胞上VDCC内向Ca~(2 )电流检测采用全细胞膜片箝技术。结果:Cor可浓度依赖地损伤原代海马神经细胞和皮层神经细胞,IC_(50)分别为3.2μmol·L~(-1)和85μmol·L~(-1),Cor(1μmol·L~(-1)-0.1mmol·L~(-1))喷射于海马神经细胞表面即刻显著促进电压依赖性Ca~(2 )内流,其最大升幅分别是53％,191％和84％,而且Cor诱导的钙内流增加是非浓度依赖和非电压依赖的。结论:Cor可显著促进海马神经细胞电压依赖性钙通道开放,该作用可能是Cor海马神经毒性作用的机制之一。     

Potent modification of inducible CYP1A1 expression by flavonoids

The present study examined modifications of β-naphthoflavone (β-NF)-induced cytochrome P450 1A1 (CYP1A1) expression by flavonoids in mouse hepatocytes in primary culture. Some flavonoids (apigenin, chrysin, flavone, flavanone, galangin, luteolin, and naringenin) by themselves induced CYP1A1 mRNA expression, especially flavone which was even more effective than β-NF. The effect on β-NF-induced CYP1A1 mRNA expression was varied, namely additive, suppressive, or both. An additive effect was observed after combined treatment with flavanone, naringenin, and chrysin, whereas kaempferol, myricetin, and quercetin decreased CYP1A1 levels. Apigenin, chrysin, galangin, luteolin, and morin synergistically enhanced β-NF-induced CYP1A1 expression at 24 h, but considerably suppressed it at 9 h. The structure-activity relationship of flavonoids affecting CYP1A1 expression as inducers or inhibitors is discussed. The present observations suggest the need to reveal the mechanism by which CYP1A1 expression is modified by flavonoids for risk assessment, since CYP1A1 activates environmental carcinogenic polycyclic hydrocarbons and flavonoids are major constituents in food.     

Involvement of Bcl-xL degradation and mitochondrial-mediated apoptotic pathway in pyrrolizidine alkaloids-induced apoptosis in hepatocytes

Pyrrolizidine alkaloids (PAs) are natural hepatotoxins with worldwide distribution in more than 6000 high plants including medicinal herbs or teas. The aim of this study is to investigate the signal pathway involved in PAs-induced hepatotoxicity. Our results showed that clivorine, isolated from Ligularia hodgsonii Hook, decreased cell viability and induced apoptosis in L-02 cells and mouse hepatocytes. Western-blot results showed that clivorine induced caspase-3/-9 activation, mitochondrial release of cytochrome c and decreased anti-apoptotic Bcl-xL in a time (8-48 h)- and concentration (1-100 μM)-dependent manner. Furthermore, inhibitors of pan-caspase, caspase-3 and caspase-9 significantly inhibited clivorine-induced apoptosis and rescued clivorine-decreased cell viability. Polyubiquitination of Bcl-xL was detected after incubation with 100 μM clivorine for 40 h in the presence of proteasome specific inhibitor MG132, indicating possible degradation of Bcl-xL protein. Furthermore, pretreatment with MG132 or calpain inhibitor I for 2 h significantly enhanced clivorine-decreased Bcl-xL level and cell viability. All the other tested PAs such as senecionine, isoline and monocrotaline decreased mouse hepatocytes viability in a concentration-dependent manner. Clivorine (10 μM) induced caspase-3 activation and decreased Bcl-xL was also confirmed in mouse hepatocytes. Meanwhile, another PA senecionine isolated from Senecio vulgaris L also induced apoptosis, caspase-3 activation and decreased Bcl-xL in mouse hepatocytes. In conclusion, our results suggest that PAs may share the same hepatotoxic signal pathway, which involves degradation of Bcl-xL protein and thus leading to the activation of mitochondrial-mediated apoptotic pathway.     

氯通道阻滞剂抑制人肾小球系膜细胞增殖

目的研究氯通道阻滞剂对肾小球系膜细胞增殖的作用。方法细胞计数和3H-TdR参入量测定确定细胞增殖,应用流式细胞术检测细胞周期时相。结果同对照组相比,氯通道阻滞剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸5-nitro-(3-phenylpropylamino)-benzoicacid,NPPB、尼氟灭酸使人肾小球系膜细胞数和3H-TdR参入量明显减少(P<0·01,n=8),并呈剂量依赖关系,但不增加系膜细胞乳酸脱氢酶释放量(P>0·05,n=8)。NPPB和尼氟灭酸均使细胞周期停滞在G0/G1期(n=3)。结论氯通道阻滞剂NPPB、尼氟灭酸对人肾小球系膜细胞增殖具有抑制作用。     

Screening inhibitory effects of flavonoids isolated from Artemisia sacrorum on lipid accumulation in 3T3-L1 cells

OBJECTIVE To investigated the inhibitory effects of 12 flavonoids(compound 1-12: jaceosidin, kaempferol, chrysoeriol, quercetin, apigenin, hispidulin, luteolin,quercitrin, rutin, isorhamnetin, genkwanin, acacetin),which we had isolated from Artemisia sacrorum Ledeb.on lipid accumulation in 3T3-L1 cells. METHODS In screening experiments, the cells viability of these 12 flavonoids on the mouse preadipocyte 3T3-L1 cells were determined by MTS. The lipid accumulation and triglyceride(TG) levels were measured by Oil-Red O staining and TG test kit. RESULTS The MTS results showed that 1 and 4 have no toxicity on 0-10 μmol·L~(-1), 6 and 8 on 0-20 μmol·L~(-1), other compounds on 0-40 μmol·L~(-1). And OilRed O staining indicated that 1, 3, 5, 6, 7, 8, 10, 11 and12 inhibited the foramtion of lipid "ring" compared with model group. Further determined the content of TG manifested that compared with model group, the TG levels of1, 3, 5, 6, 7, 8, 10, 11 and 12 reduced to 51.6%, 60.6%,55.6%, 62.8%, 61.2%, 68.1%, 44.2%, 63.2% and 42.1%.CONCLUSION The compound of Jaceosidin, chrysoeriol,apigenin, hispidulin, luteolin, quercitrin isorhamnetin, genkwanin and acacetin have potential anti-adipogenic effects.     

染料木素对离体豚鼠左室乳头肌收缩功能的影响

目的观察染料木素对离体豚鼠左室乳头肌收缩功能的影响,并探讨其作用机制。方法将离体豚鼠乳头肌置于装有KH液的灌流肌槽中,待平衡后,加入各种药物观察乳头肌收缩活动的变化。结果染料木素和异丙肾上腺素相似,可增强豚鼠左室乳头肌的收缩活动,染料木素(1、100μmol.L-1)的作用还具有明显的剂量依赖性。心得安(1μmol.L-1)和异搏定(0.5μmol.L-1)虽可明显阻断异丙肾上腺素(2μmol.L-1)的正性肌力作用,但对染料木素(100μmol.L-1)的心肌收缩增强效应无明显改变;同时发现染料木素(1、10μmol.L-1)对细胞外液Ca2+浓度升高而诱发的心肌收缩力增强也无明显影响。另外,它莫西芬(1μmol.L-1)可明显减弱染料木素的正性肌力作用,但正矾酸钠(1μmol.L-1)对其作用无明显影响。结论染料木素可增强心肌收缩活动,其作用与心肌细胞膜上的β肾上腺素能受体和钙通道激活以及酪氨酸激酶途径无关,可能与肌质网Ca2+的摄取和利用有关。     

杨梅素对淋巴细胞活化及增殖的影响

目的研究杨梅素(myricetin)对小鼠T细胞活化及增殖的影响,探讨其作为免疫调节药物开发的可能性并提供相关实验依据。方法无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的杨梅素预先孵育1h,用多克隆刺激剂刀豆蛋白(ConA)刺激T细胞活化,利用荧光标记的单克隆抗体双染技术,流式细胞仪检测杨梅素对小鼠CD3+T细胞CD69表达的影响;采用3H-TdR参入法检测杨梅素对淋巴细胞增殖的影响,采用半定量RT-PCR技术从mRNA水平检测杨梅素对IL-2mRNA表达的影响。采用ELISPOT检测杨梅素对IFN-γ分泌的影响。结果杨梅素能抑制T细胞早期活化标志CD69的表达,并能抑制淋巴细胞增殖反应,同时对淋巴细胞活化后IL-2 mRNA的表达及IFN-γ的分泌也有抑制作用。结论杨梅素对淋巴细胞的活化增殖反应具有抑制作用。     

盐酸吲满氨酯及依色林对胆碱酯酶的抑制作用

用微量二硫-双-硝基苯甲酸(DTNB)法测定胆碱酯酶(ChE)活力,比较了盐酸吲满氨酯(TMDMC)与依色林抑制ChE的作用,对于电鳐AChE依色林表现为竞争性抑制,K_i=0.115 μmol·L~1,TMDMC表现为竞争与非竞争混合性抑制,K_i=3.870μmol·L~(-1),K_i=16.321μmol·L~(-1)依色林和TMDMC抑制小鼠脑匀浆ChE活力的IC_(50)分别为1.78和5.07μmol·L~1、抑制小鼠全血ChE活力的IC_(50)分别为19.52和3.60μmol·L~1,说明TMDMC与依色林虽属同类化合物,但它们的抑酶类型和对真,假性ChE的抑制强度是不同的。     

冠脉内应用氨甲酰胆碱对心室复极的影响

目的探讨氨甲酰胆碱对完整动物心脏心室复极的影响。方法在4只绵羊冠状动脉回旋支内分别注入1.0 mol.L-1和2.5 mol.L-1的氨甲酰胆碱,注射时间3m in。记录回旋支支配区域心外膜心电图,测量心室的激动-恢复间期(AR I)以代表心室复极时间。静脉给予一氧化氮合成抑制剂(L-精氨酸20 mg.kg-1)后,再次冠脉内给予2.5 mol.L-1的氨甲酰胆碱。结果回旋支内灌注1.0 mol.L-1和2.5 mol.L-1的氨甲酰胆碱导致其支配区域心外膜心电图心室激动-恢复间期分别延长(38±17)m s和(58±14)m s(P<0.05)。氨甲酰胆碱所致的心室激动-恢复间期延长被L-精氨酸所阻断。结论冠脉内注射氨甲酰胆碱延长心室激动-恢复间期或心室复极时间,内源性一氧化氮很可能介导氨甲酰胆碱心室复极的影响。