抗CD34单克隆抗体HI273的制备和鉴定

ＣＤ３４抗原可选择性地表达于不成熟的造血干／祖细胞、血管内皮细胞和一些组织的成纤维细胞上。这一发现 ,不仅有利地促进了对造血干／祖细胞识别、发育、增殖和分化的研究 ,而且大大推动了临床上应用ＣＤ３４ 细胞回输体内治疗某些血液病和恶性肿瘤的开展。目前 ,抗ＣＤ３４ｍＡｂ已成为研究造血调控、识别、分离富集造血干／祖细胞 ,以及分析白血病细胞表型的非常有用的工具。国际上 ,经ＨＬＤＡ命名的抗ＣＤ３４ｍＡｂ近４０株〔１ ,２〕。国内仅于１９９５年见舒翠玲等〔３〕报道的用表达ＣＤ３４抗原的重组痘苗病毒为抗原 ,制备的４…     

前列腺特异性抗原单克隆抗体的研制及其初步鉴定

本研究利用从正常男性精液中提取纯化的前列腺特异性抗原免疫小鼠，建立了２株可持续稳定分泌抗前列腺特异性抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为Ｐ１３和Ｐ２６。此２株杂交瘤细胞在体外连续传代培养半以上，冻存后复苏仍可保持抗体分泌能力，利用所制备的单克隆抗体对良性前列腺肥大，前列腺癌，乳腺癌，胃癌，食道癌和卵巢癌病人的病理切片标本进行免疫线化测定，证明其有一定的前列腺特异性。     

抗人CD100单克隆抗体的制备与初步鉴定

目的：研制可识别天然CD100分子的单克隆抗体（mAb)。方法：采用真核表达的CD100分子免疫BALB/c小鼠，以间接ELISA法筛选阳性杂交瘤，并分别用人急性T淋巴细胞性白血病细胞系MOLT-4，猿T淋巴细胞系MLA-144及猴EB病毒转化的B淋巴细胞系（BLCL），进行间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定mAb的特异性。结果：共获得7株可稳定分泌mAb的杂交瘤细胞株。所有mAb均可识别人和猴细胞系的膜表面天然CD100分子，其中6株可识别猿细胞系膜表面的天然CD100分子，结论：成功地制备了7株抗CD100分子的特异性mAb。为研究人和猿，猴CD100分子的结构与功能提供了新的手段。     

用e抗原阳性血清制备抗-HBe单克隆抗体及其鉴定

目的：为了解决多克隆抗HBe抗体的来源困难和单克隆抗体的配对问题。方法：用人的e抗原阳性血清，经过提纯后免疫BALB／c小鼠，用杂交瘤技术获得8株能分泌抗HBe单抗的细胞株。结果：7株单抗为IgG1,1株11E8为IgG2a，8株单抗标酶后能与基因工程抗原制备的包被单抗配对的只有11E8，11E8酶标单抗的效价为1∶6400，并且仅与HBeAg起反应，与HBsAg，HBcAg，正常人血清均不发生交叉反应，用于临床标本检测中与多克隆抗HBe酶标抗体的结果一致。结论：血源性的单克隆抗HBe-HRP，可以替代多克隆抗HBe-HRP制备诊断试剂盒，克服了多克隆抗HBe来源困难问题。     

人CD34抗原基因克隆及鉴定

ＣＤ３４抗原是一个阶段特异性白细胞分化抗原，在早期造血调控方面起着重要的作用，本文采用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从高效表达ＣＤ３４抗原的ＫＧ－ｌａ细胞系中成功地克隆出ＣＤ３４抗原全长ｃＤＮＡ，并对重组基因进行了酶切鉴定和序列分析，结果表明除胞内区有一碱基改变，其它序列与报道完全一致。     

抗CD30L/CD153单克隆抗体的制备与初步鉴定

CD30L（CD153）是肿瘤坏死因子超家族（TNFSF）中的一个成员，属Ⅱ型跨膜蛋白，其胞膜外区与其他TNFSF成员（如TNF—α、LT—α和CIMOL等）有较高同源性，主要表达于活化T细胞、单核／巨噬细胞、中性粒细胞，以及某些髓系和淋巴系起源的造血系统的恶性肿瘤细胞。CD30L结合其受体CD30，介导分化和活化信号，促进细胞增殖和活化，     

CD40单克隆抗体的制备、筛选及功能鉴定

CD40是肿瘤坏死因子受体超家族成员之一,属于Ⅰ型跨膜糖蛋白,其自然配体是CD40L。CD40-CD40L信号通路在许多重要的生理和病理过程中都起到关键的调节作用。基于其在激活免疫应答中的重要作用,在肿瘤免疫治疗中,具有激活CD40-CD40L信号的CD40激动剂抗体可用于提高抗肿瘤免疫应答;在移植排斥和炎症反应中,CD40-CD40L信号也起重要作用,阻断CD40信号通路是目前治疗风湿性关节炎、肠炎、系统性红斑狼疮、多发性硬化和糖尿病的一个重要靶点。制备CD40阻断性抗体或激动剂抗体不仅可用于检测CD40分子表达,还可以开发用于炎症性疾病或肿瘤治疗的免疫疗法。本研究表达CD40胞外段蛋白,通过免疫制备14株CD40单克隆抗体,筛选发现全部可作为western blotting检测CD40蛋白表达的抗体,9株CD40抗体可作为一抗用于流式细胞术检测人CD40表达,1株CD40抗体能阻断人CD40L和CD40相互作用。有意义的是,8株CD40抗体能激活人CD40分子信号通路,另外有10株能激活小鼠脾脏细胞CD40下游基因的表达,7株能上调小鼠脾脏B细胞表面共刺激分子CD86的表达。本研究制备一系列CD40抗体,可用于CD40检测、CD40信号的阻断或激活。     

HLDA7专题讨论会新增CD编号和抗原

第7届人类白细胞分化抗原专题讨论会(7th workshop and conference on human leukocyte differentiation antigen, HLDA7)于2000年6月在英国Harrogate召开.HLDA7增加了67个新的CD编号(CD167a～CD247,其中仍有暂时空缺编号),并对前六届确定的CD1～CD166中补充了16个新的CD抗原,因此,实际上本次大会新增加83个CD编号或抗原.     

抗人CD38单克隆抗体的制备、鉴定及其功能的初步研究

目的：研制抗人CD38抗原分子的单克隆抗体，进一步研究其生物学功能。方法：采用高表达CD38抗原的Daudi细胞免疫Balb/c小鼠；取其脾细胞与SP2/0细胞融合；用间接免疫荧光法进行杂交瘤筛选；流式细胞术、免疫沉淀法与CD38分子原核表达产物的Western-blot分析鉴定单克隆抗体的特异性。以MTT（四甲偶氨唑盐）法检测单克隆抗体抑制细胞增殖以及介导补体杀伤靶细胞的功能。结果：获得了一株抗人CD38分子的单克隆抗体1C6，流式细胞术显示它具有CD38抗原特异的细胞反应谱，其识别的抗原分子质量为45000u。与CD38分子原核表达产物的Western-blot分析表明，其可特异识别CD38分子胞外结构域。MTT法显示其可介导补体杀伤靶细胞。结论：成功制备了抗人CD38分子的单克隆抗体，并进行了初步的功能研究。     

CD8类McAb—SM4的研制与鉴定

本文报导一株抗人T细胞亚群单克隆抗体SM_4的研制与鉴定。SM_4仅与T细胞中的一个亚群反应,在淋巴组织冰冻切片上,SM_4只与胸腺依赖区的部分细胞反应,其组织分布特征与CD_8单抗相类似。叠加试验结果表明SM_4与CD_8类单抗识别同一细胞亚群——Ts/Tc亚群。竞争抑制试验进一步证明SM_4识别CD_8分子上某一特定表位。本文还就CD_8亚群异质性问题及SM_4的应用潜力进行了讨论。     

抗人gp130分子单克隆抗体的制备和鉴定

ｇｐ１３０可与许多细胞因子受体（ＩＬ－６Ｒ,ＩＬ－１１Ｒ,ＯＳＭＲ,ＬＩＦＲ,ＣＮＴＦＲ和ＣＴ－１Ｒ）组成受体复合物,并在这类细胞因子的信号转导中的起着重要的作用。方法以痘苗病毒为载体构建获得的可溶性ＣＤ１３０（ｓＣＤ１３０）为免疫原,通过融合的方法。得到４株稳定分泌抗ＣＤ１３０单克隆抗体（ｍＡｂ）Ｌ２,Ｌ４ａ,Ｌ４ｂ和Ｌ５）的杂交瘤细胞株。结果本组ｍＡｂ对靶细胞具有识别特异性,不但可识别相对分子     

通过HIT_(8a)和HIT_(8b)两个单克隆抗体鉴定发现CD_8抗原有不同的表位

用间接免疫荧光法、免疫组化技术鉴定了HIT_(8a)和HIT_(8b)两个单克隆抗体(单抗)对各种正常组织、细胞系和各种白血病患者细胞的反应性,证明其反应模式与CD8单抗相似。HIT_(8a)、HIT_(8b)识别的胸腺细胞上抗原分子量分别为 59和60KD(未还原),也与CD8近似。然而,竞争抑制试验显示,9个国际命名的 CD8单抗中只有5个可以完全抑制 HIT_(8a)、HIT_(8b)-FITC与靶细胞结合,4个无作用。证实HIT_(8a)和 HIT_(8b)是 CD8样抗体,识别同一抗原位点。但也揭示 CD8抗原有不同表位。本文对此进行了讨论。     

抗HGV NS5区重组抗原单克隆抗体的制备及鉴定

ＨＧＶ是１９９５年新报道的一种肝炎病毒，学者们在较短的时间内对ＨＧＶ的分子生物学、流行病学和临床特点有了一定的了解，但ＨＧＶ感染的致病机理还有待于更多的实验研究和探索，如ＨＧＶ在肝组织中的表达与分布等。本文报道了抗ＨＧＶＮＳ５区重组抗原ＭｃＡｂ的制备...     

抗Thy—1,l3T4,lyt—2单克隆抗体的产生和鉴定

本文应用淋巴细胞毒、间接免疫荧光、流式细胞分离仪和淋巴细胞转化抑制试验测定了三株杂交瘤细胞所分泌的抗小鼠T细胞表面Thy—1、L3T4、Lyt—2单克隆抗体的特异性和效价。发现抗L3T4和抗Thy—1单克隆抗体对胸腺和脾脏细胞的识别率为95％和25％;抗L3T4和抗Lyt—2单克隆抗体对胸腺细胞的结合率分别为80％和90％;对脾脏细胞结合率分别为18％和11％。经抗Thy—1和抗L3T4单克隆抗体加补体处理后的脾细胞对ConA刺激的增殖能力明显被抑制,而对LPS刺激的增殖能力正常。本文结果除抗L3T4、Lyt—2单抗的细胞毒试验未见报导外,其它结果均和原作者的报导符合。