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miR-125b-5p通过负调控RAB3D基因表达抑制骨肉瘤细胞增殖与迁移
引用本文:谈秋瑜,吴 旭,纪 方,吴少云,颜 亮.miR-125b-5p通过负调控RAB3D基因表达抑制骨肉瘤细胞增殖与迁移[J].南方医科大学学报,2023,43(1):68-75.
作者姓名:谈秋瑜  吴 旭  纪 方  吴少云  颜 亮
作者单位:皖南医学院活性生物大分子安徽省重点实验室,安徽 芜湖 241002;海军军医大学附属长海医院,上海 200433;芜湖医药卫生学校,安徽 芜湖 241000
摘    要:目的 探讨 miR-125b-5p 调控 RAB3D 在骨肉瘤增殖与迁移中的作用机制。方法 通过 qRT-PCR 检测正常骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞系(MG63、HOS)中miR-125b-5p的表达水平。骨肉瘤细胞系中通过脂质体转染升高或降低miR-125b-5p的表达,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤细胞增殖和迁移的变化;通过生物信息学软件预测miR-125b-5p可能调控的靶基因为RAB3D;通过Western blot检测正常骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞系(MG63、HOS)中RAB3D的表达水平;骨肉瘤细胞系中通过脂质体转染升高或降低miR-125b-5p的表达,通过Western blot及qRT-PCR实验检测骨肉瘤细胞中RAB3D mRNA及蛋白表达水平;并在骨肉瘤细胞中通过脂质体转染升高或降低RAB3D的表达,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤增殖和迁移的变化;随后在骨肉瘤细胞中通过脂质体转染同时升高miR-125b-5p和RAB3D的表达量,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤细胞增殖和迁移的变化。结果 qRT-PCR结果表明在骨肉瘤细胞(MG63、HOS)中miR-125b-5p的表达明显下调(P<0.05)。3种生物信息学软件预测RAB3D是miR-125b-5p可能调控的靶基因。qRT-PCR、Western blot结果显示,miR-125b-5p 表达量升高,骨肉瘤细胞(MG63、HOS)中 RAB3D 的蛋白表达量下降(P<0.05);miR-125b-5p 表达量降低,骨肉瘤细胞(MG63、HOS)中RAB3D的蛋白表达量下降(P<0.05),而RAB3D的mRNA水平没有发生变化。细胞增殖及迁移实验结果显示,miR-125b-5p与RAB3D对细胞增殖及迁移的影响相反,而同时在骨肉瘤细胞内升高miR-125b-5p与RAB3D的表达量,RAB3D对骨肉瘤细胞增殖及迁移的影响在重新升高miR-125b-5p表达量时被阻断(P<0.05)。结论 miR-125b-5p在转录后水平通过调控RAB3D的表达抑制了骨肉瘤细胞的增殖和迁移。

关 键 词:miR-125b-5p  RAB3D  骨肉瘤细胞  细胞增殖  细胞迁移  

miR-125b-5p inhibits proliferation and migration of osteosarcoma cells by negatively regulating RAB3D expression
TAN Qiuyu,WU Xu,JI Fang,WU Shaoyun,YAN Liang.miR-125b-5p inhibits proliferation and migration of osteosarcoma cells by negatively regulating RAB3D expression[J].Journal of Southern Medical University,2023,43(1):68-75.
Authors:TAN Qiuyu  WU Xu  JI Fang  WU Shaoyun  YAN Liang
Affiliation:Provincial Key Laboratory of Biological Macro- molecules Research, Wannan Medical College, Wuhu 241002, China; Changhai Hospital Affiliated to Naval Military Medical University, Shanghai 200433, China; Wuhu Medical and Health School, Wuhu 241000, China
Abstract:
Keywords:miR-125b-5p  RAB3D  osteosarcoma cells  cell proliferation  cell migration  
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