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稳定表达红色荧光蛋白的人胚胎干细胞系的建立
引用本文:胡菲菲,张 纬,欧阳琦,王荣根,李 泽,王 冠,王 盈,杨海元,戴一凡.稳定表达红色荧光蛋白的人胚胎干细胞系的建立[J].南京医科大学学报,2016(7):868-873.
作者姓名:胡菲菲  张 纬  欧阳琦  王荣根  李 泽  王 冠  王 盈  杨海元  戴一凡
作者单位:南京医科大学江苏省异种移植重点实验室,江苏 南京 211166,南京医科大学江苏省异种移植重点实验室,江苏 南京 211166,中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南 长沙 410078,南京医科大学江苏省异种移植重点实验室,江苏 南京 211166,南京医科大学江苏省异种移植重点实验室,江苏 南京 211166,南京医科大学江苏省异种移植重点实验室,江苏 南京 211166,南京医科大学江苏省异种移植重点实验室,江苏 南京 211166,南京医科大学江苏省异种移植重点实验室,江苏 南京 211166,南京医科大学江苏省异种移植重点实验室,江苏 南京 211166
基金项目:江苏省异种移植重点实验室科研经费(BM2012116)
摘    要:目的:建立可以稳定表达红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)的人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)系?方法:优化核转染方法后,将RFP表达载体pEF1α-DsRed-Express2导入hESCs中?利用碱性磷酸酶染色?RT-PCR?免疫荧光染色和类胚体形等方法,比较核转染前后hESCs的干细胞特性?结果:核转染后hESCs的碱性磷酸酶染色结果为阳性?核转染前后hESCs的Oct4?Sox2?Klf4?Nanog基因的表达未出现明显差异?RFP-hESCs具有三胚层分化潜能,并且可稳定传30代以上?结论:成功建立稳定表达红色荧光蛋白的hESCs,干细胞特性不受RFP的影响,可用于后续的实验研究?

关 键 词:人胚胎干细胞  核转染  红色荧光蛋白  类胚体
收稿时间:2016/3/20 0:00:00

Establishment of human embryonic stem cell line stably expressing red fluorescent protein
Hu Feifei,Zhang Wei,Ouyang Q,Wang Ronggen,Li Ze,Wang Guan,Wang Ying,Yang Haiyuan and Dai Yifan.Establishment of human embryonic stem cell line stably expressing red fluorescent protein[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2016(7):868-873.
Authors:Hu Feifei  Zhang Wei  Ouyang Q  Wang Ronggen  Li Ze  Wang Guan  Wang Ying  Yang Haiyuan and Dai Yifan
Affiliation:Jiangsu Key Laboratory of Xenotransplantation,NJMU,Nanjing 211166,Jiangsu Key Laboratory of Xenotransplantation,NJMU,Nanjing 211166,Institute of Reproductive and Stem Cell Engineering,Central South University,Changsha 410078,China,Jiangsu Key Laboratory of Xenotransplantation,NJMU,Nanjing 211166,Jiangsu Key Laboratory of Xenotransplantation,NJMU,Nanjing 211166,Jiangsu Key Laboratory of Xenotransplantation,NJMU,Nanjing 211166,Jiangsu Key Laboratory of Xenotransplantation,NJMU,Nanjing 211166,Jiangsu Key Laboratory of Xenotransplantation,NJMU,Nanjing 211166 and Jiangsu Key Laboratory of Xenotransplantation,NJMU,Nanjing 211166
Abstract:
Keywords:human embryonic stem cells  nuclear transfection  red fluorescent protein  embryonic body
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