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间充质干细胞旁分泌物质诱导肝星状细胞凋亡的体外研究
引用本文:徐 喨,施启鹏,周 晗,蔡 洁,李 军,章莉莉.间充质干细胞旁分泌物质诱导肝星状细胞凋亡的体外研究[J].南京医科大学学报,2014(8):1040-1045.
作者姓名:徐 喨  施启鹏  周 晗  蔡 洁  李 军  章莉莉
作者单位:南京医科大学第一附属医院感染病科,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院感染病科,江苏 南京 210030;南京医科大学第一附属医院感染病科,江苏 南京 210031;南京医科大学第一附属医院感染病科,江苏 南京 210032;南京医科大学第一附属医院感染病科,江苏 南京 210033;南京医科大学第一附属医院感染病科,江苏 南京 210034
基金项目:江苏省医学创新团队与领军人才资助项目(LJ201121)
摘    要:目的:研究间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)旁分泌物质对活化的肝星状细胞Lx-2的影响及作用机制?方法:应用6孔塑料细胞培养板,每孔使用半透膜,构建Transwell共培养体系;将骨髓来源的间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BM-MSC)和人肝星状细胞系Lx-2分别接种在体系的上下层,并把此组作为实验组,单独培养的Lx-2作为对照组,观察培养液中MSC旁分泌物质对Lx-2的影响?采用流式细胞术及Hoechst33342染色法分别检测Lx-2细胞凋亡的情况,qRT-PCR和Western blot检测Lx-2中解耦联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)的mRNA和蛋白水平的表达量,荧光探针法检测Lx-2细胞内及线粒体中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的荧光强度,采用硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量?结果:与对照组相比,Hoechst 33342染色后可见部分Lx-2染色质固缩?颗粒状荧光等凋亡细胞典型表现,实验组Lx-2凋亡率是对照组的2.6倍(P < 0.05)?实验组Lx-2中UCP2 mRNA及蛋白表达量显著低于对照组(P < 0.05);实验组Lx-2细胞内和线粒体中ROS水平明显升高?细胞培养上清中MDA为(0.43 ± 0.47) mmol/L,显著高于对照组(0.16 ± 0.43)mmol/L(P < 0.05)?结论:MSC旁分泌物质有诱导Lx-2细胞凋亡的作用;可能与MSC旁分泌物质抑制UCP2的表达,促进细胞内及线粒体ROS过量生成有关?

关 键 词:间充质干细胞  旁分泌  肝星状细胞  凋亡  活性氧  解耦联蛋白2
收稿时间:2014/3/25 0:00:00

Human mesenchymal stem cells secreted factors inducing apoptosis of hepatic stellate cells in vitro
Xu Liang,Shi Qipeng,Zhou Han,Cai Jie,Li Jun and Zhang Lili.Human mesenchymal stem cells secreted factors inducing apoptosis of hepatic stellate cells in vitro[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2014(8):1040-1045.
Authors:Xu Liang  Shi Qipeng  Zhou Han  Cai Jie  Li Jun and Zhang Lili
Affiliation:Department of Infectious Disease,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China;Department of Infectious Disease,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210030,China;Department of Infectious Disease,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210031,China;Department of Infectious Disease,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210032,China;Department of Infectious Disease,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210033,China;Department of Infectious Disease,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210034,China
Abstract:
Keywords:
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