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雌激素受体GPR30通过TXNIP/NLRP3信号通路减弱氧糖剥夺/复氧诱导的BV-2细胞氧化应激损伤和炎症反应
引用本文:李智勇,陈政刚,彭俊.雌激素受体GPR30通过TXNIP/NLRP3信号通路减弱氧糖剥夺/复氧诱导的BV-2细胞氧化应激损伤和炎症反应[J].重庆医科大学学报,2023,48(6):636-640.
作者姓名:李智勇  陈政刚  彭俊
作者单位:1.海南医学院第一附属医院医疗质量管理科,海口 570102;2.海南医学院第一附属医院神经外科,海口 570102;3.中南大学湘雅医学院附属海口医院神经外科,海口 570208
基金项目:海南省自然科学基金青年资助项目(编号:822RC865)。
摘    要:目的 通过研究雌激素受体G蛋白偶联受体30(G protein-coupled receptor 30,GPR30)对氧糖剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation and reperfusion,OGD/R)BV-2小胶质细胞的氧化应激损伤和炎症反应的调控作用,探讨其对OGD/R BV-2小胶质细胞的保护作用及其相关机制。方法 取BV-2小胶质细胞ODG 4 h后再灌注2、4、6或12 h。Western blot检测细胞中GPR30的蛋白表达水平。将pcDNA3.1、pcDNA3.1-GPR30、sh-NC、sh-GPR30质粒转染BV-2小胶质细胞,OGD 4 h后再灌注12 h。qRT-PCR检测GPR30 mRNA的表达水平,验证其转染效率,Western blot检测细胞中GPR30、硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interactingprotein,TXNIP)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶剪切体-1(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase-1,cleaved Caspase-1)的蛋白表达水平,ELISA检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)水平。结果 GPR30在OGD/R后显著上升,在6 h时达到峰值,而在12 h时与对照组没有显著差异。随后确定OGD处理4 h,复氧12 h的时间点进行后续实验。qRT-PCR验证慢病毒转染成功,与对照组相比,OGD/R组细胞中ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18水平及TXNIP、NLRP3、cleaved-Caspase-1蛋白表达水平显著上升,SOD活性显著下降(P<0.05);过表达GPR30抑制了ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18水平及TXNIP、NLRP3、cleaved-Caspase-1蛋白表达水平,促进了SOD活性;而干扰GPR30表达发挥了相反的作用。结论 GPR30能抑制 ODG/R处理后BV-2细胞内TXNIP/NLRP3信号通路分子的表达,抑制ODG/R诱导的 BV-2细胞氧化应激损伤和炎症反应,这可能是其保护ODG/R细胞的分子机制之一。

关 键 词:G蛋白偶联受体30  氧糖剥夺/再灌注  BV-2  小胶质细胞  氧化应激损伤  炎症反应
收稿时间:2022/11/16 0:00:00

Estrogen receptor GPR30 attenuates oxygen-glucose deprivation and reperfusion-induced oxidative stress injury and inflammation in BV-2 cells through TXNIP/NLRP3 signaling pathway
Li Zhiyong,Chen Zhenggang,Peng Jun.Estrogen receptor GPR30 attenuates oxygen-glucose deprivation and reperfusion-induced oxidative stress injury and inflammation in BV-2 cells through TXNIP/NLRP3 signaling pathway[J].Journal of Chongqing Medical University,2023,48(6):636-640.
Authors:Li Zhiyong  Chen Zhenggang  Peng Jun
Abstract:
Keywords:G protein-coupled receptor 30  oxygen-glucose deprivation and reperfusion  BV-2  microglia  oxidative stress injury  inflammation
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