| 比格犬ERβ_(1293)基因真核载体的构建及其在HEK293T细胞中的表达和定位 |
| |
| 引用本文： | 甘艺,钟睿,任秀梅,赵彦斌,胡仲明,刘冰,陈旖,孙兆增,曾林,杨焕民.比格犬ERβ_(1293)基因真核载体的构建及其在HEK293T细胞中的表达和定位[J].中国比较医学杂志,2014(2). |
| |
| 作者姓名： | 甘艺 钟睿 任秀梅 赵彦斌 胡仲明 刘冰 陈旖 孙兆增 曾林 杨焕民 |
| |
| 作者单位： | 黑龙江八一农垦大学动物科技学院;军事医学科学院实验动物中心;沈阳农业大学畜牧兽医学院;吉林大学畜牧兽医学院; |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31172164);十二五重大专项“高致病病源动物模型研究”(2012ZX10004502) |
| |
| 摘 要： | 目的观察比格犬Myc标签ERβ1293重组真核表达载体在HEK293T细胞中的表达及定位。方法以pEGFP-N1-ERβ1293重组真核表达载体为模板,PCR保真酶扩增得到ERβ1293基因编码区全长。Myc标签ERβ1293重组真核载体瞬时转染HEK293T细胞,运用蛋白质印迹技术(Western blotting)和间接免疫荧光技术(indirect immunofluorescence,IF)鉴定pcDNA3.1-Myc-ERβ1293在HEK293T细胞中的表达和定位情况。结果成功构建pcDNA3.1-Myc-ERβ1293重组真核表达载体,转染至HEK293T细胞中。Western blotting检测有蛋白条带表达,共聚焦显微镜下观察IF处理后的转染细胞,荧光定位于细胞质。结论前期实验得到比格犬ERβ剪切异构体ERβ1293编码区序列,缺失第四外显子,导致其与配体结合能力减弱或消失,因此目的基因编码蛋白定位在细胞中发生变化。
|
| 关 键 词： | 比格犬 ERβ 蛋白定位 第外显子缺失 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
