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斯氏狸殖吸虫半胱氨酸蛋白酶基因克隆及由体定位
引用本文:王英,张锡林,张艳玲,段建华,张敬如,黄复生. 斯氏狸殖吸虫半胱氨酸蛋白酶基因克隆及由体定位[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2003, 0(4)
作者姓名:王英  张锡林  张艳玲  段建华  张敬如  黄复生
作者单位:第三军医大学基础医学部病原生物学教研室,第三军医大学基础医学部病原生物学教研室,第三军医大学西南医院神经内科,第三军医大学基础医学部病原生物学教研室,第三军医大学基础医学部病原生物学教研室,第三军医大学基础医学部病原生物学教研室 重庆 400038,重庆 400038,重庆 400038,重庆 400038,重庆 400038,重庆 400038
摘    要:目的 克隆斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段,并研究该酶在斯氏狸殖吸虫的表达部位。方法 通过RT-PCR方法扩增斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段,TA克隆入pUCm-T载体,鉴定、测序;利用DNASIS程序推导其编码氨基酸序列,并比较分析与其相关虫种半胱氨酸蛋白酶氨基酸序列同源性。采用地高辛标记原位杂交技术检测该酶基因在斯氏狸殖吸虫成虫的表达及组织定位。结果 经RT-PCR和对阳性克隆鉴定、测序后获得一cDNA序列,长495bp;同源性分析结果显示,该序列与相关虫种的半胱氨酸蛋白酶存在较高同源性,组成半胱氨酸催化三联体的半胱氨酸、组胺酸和天冬酰胺残基高度保守。原位杂交结果显示斯氏狸殖吸虫成虫的肠管上皮呈阳性着色。结论 克隆获得了斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段,该片段包含了与半胱氨酸蛋白酶活性和空间结构相关的重要基因位点。斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶的表达部位主要为肠管上皮。

关 键 词:斯氏狸殖吸虫  半胱氨酸蛋白酶  克隆  原位杂交

cDNA Cloning and Location of Pagumogonimus skrjabini Cysteine Protease
WANG Ying,ZHANG Xi-lin,ZHANG Yan-ling,DUAN Jian-hua,ZHANG Jing-ru,HUANG Fu-sheng. cDNA Cloning and Location of Pagumogonimus skrjabini Cysteine Protease[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2003, 0(4)
Authors:WANG Ying  ZHANG Xi-lin  ZHANG Yan-ling  DUAN Jian-hua  ZHANG Jing-ru  HUANG Fu-sheng
Affiliation:WANG Ying,ZHANG Xi-lin,ZHANG Yan-ling,DUAN Jian-hua,ZHANG Jing-ru,HUANG Fu-sheng Department of Pathogenic Biology,The Third Military Medical University,Chongqing 400038 Department of Neuropathy,Southwest Hospital,The Third Military Medical University,Chongqing 400038
Abstract:
Keywords:Pagumogonimus skrjabini  cysteine protease  clone  hybridization in situ
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