Survivin反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞凋亡的诱导效应 |
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作者姓名: | 高大新 张海燕 杨向红 黄涛 王岩峰 吕刚 |
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作者单位: | 1.中国医科大学附属第一医院 1 骨科, 2 内分泌科, 3 中国医科大学基础医学院实验病理学研究室,辽宁,沈阳,110001 |
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摘 要: | 目的:利用骨肉瘤OS-732细胞,探讨survivin反义寡核苷酸(ASODN)对survivin基因表达的影响及其诱导肿瘤细胞凋亡的效应。方法:设计合成特异性靶向survivin的ASODN,以不同浓度和时间对OS-732细胞进行转染,并设空白、正义(SODN)对照组进行比较。采用RT-PCR、Westernblotting、免疫细胞化学技术检测各组OS-732细胞中survivinmRNA、蛋白表达状态,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法、流式细胞仪检测细胞凋亡水平和形态变化,MTT法检测细胞生长抑制情况,激酶活性测定法检测细胞中caspase-3活性程度。结果:转染ASODN各组OS-732细胞survivinmRNA和蛋白表达均明显弱于空白对照组、SODN组;细胞凋亡率(AI)显著增加,细胞生长相应受抑,caspase-3活性显著提高;上述效应在ASODN各组存在一定的时间浓度依赖性;而SODN各组与空白对照组间各项指标均无明显差异。结论:ASODN能够特异性下调OS-732细胞中survivin基因表达,激活凋亡效应蛋白酶caspase-3,在诱导肿瘤细胞凋亡、抑制增殖中发挥重要作用。
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关 键 词: | 寡核苷酸类 反义 基因 survivin 骨肉瘤 细胞凋亡 |
文章编号: | 1000-4718(2006)03-0495-06 |
收稿时间: | 2004-08-13 |
修稿时间: | 2004-08-132004-11-15 |
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