| C/EBPα参与小鼠胰岛β细胞囊泡谷氨酰胺转运子2基因表达的调控 |
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| 作者姓名： | 吴柱国 刘世明 陈心春 |
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| 作者单位： | 1.广州医学院第二附属医院,广东,广州,510260;2.广东医学院附属深圳市第三人民医院,广东,深圳,518020 |
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| 摘 要： | 目的:探讨转录调节因子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在小鼠胰岛β细胞株MIN6的囊泡谷氨酰胺转运子2(VGLUT2)基因表达过程中的调控作用。方法:克隆小鼠VLGUT2基因的启动子区,并对其中C/EBPα的结合位点进行了核酸定点突变,以荧光素酶活力方法观察突变后的启动子活性改变情况。通过电泳迁移率实验(EMSA)检测C/EBPα与含有小鼠VGLUT2启动子区核酸序列的核苷核探针的结合能力,以CEBPαsiRNA特异性抑制转录调控因子C/EBPα的基因表达,通过荧光素酶,RT-PCR和Westernblotting方法观察抑制C/EBPα基因表达后小鼠VGLUT2的基因表达情况。结果:在对小鼠VGLUT2启动子区C/EBPα结合位点进行核酸定点突变后,小鼠VGLUT2启动子活性下降约50%,EMSA实验表明C/EBPα可与小鼠VGLUT2启动子区结合,当以C/EBPαsiRNA特异性地下调C/EBPα的表达时,小鼠VGLUT2的启动子活性、mRNA和蛋白水平也相应各自下降约60%、40%及45%。结论:C/EBPα参与了小鼠VGLUT2的基因表达调控。
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| 关 键 词： | 小鼠β细胞 启动子 基因表达调控 CCAAT增强子结合蛋白α 囊泡谷氨酰胺转运子2 |
| 收稿时间： | 2009-09-01 |
| 修稿时间： | 2009-11-05 |
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