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PEA-15真核表达载体的构建及表达
引用本文:张弘广,庄晓飞,王春利,郭石平,马炎炎.PEA-15真核表达载体的构建及表达[J].肿瘤研究与临床,2014(5):298-301.
作者姓名:张弘广  庄晓飞  王春利  郭石平  马炎炎
作者单位:山西省肿瘤医院胸外二科,太原030013
基金项目:基金项目:山西省回国留学人员科研资助项目(115)
摘    要:目的构建PEA-15真核表达载体pcDNA3.1-PEA-15,并在人类食管癌细胞(EC-109)中表达。探讨PEA-15对EC.109细胞的影响。方法采用反转录聚合酶链反应(RT—PCR)技术检测EC-109细胞中的PEA-15基因表达。构建重组真核表达载体pcDNA3.1-PEA-15。酶切及测序鉴定重组质粒正确后,脂质体介导转染至EC-109细胞中。采用RT—PCR、Westernblot法检测基因及蛋白表达。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率。结果RT—PCR显示PEA-15在EC-109细胞中表达。PCR扩增片段与预期片段大小相符,测序结果表明真核表达载体pcDNA3.1-PEA-15构建成功。转染后的细胞中PEA-15表达均增加(t值分别为4.078、5.269,均P〈0.05)。转染质粒72h后,细胞的生长抑制率较转染空质粒组降低(7.12±0.86)%、(12.55±1.78)%,t=6.163,P〈0.05]。结论成功构建重组真核表达载体pcDNA3.I-PEA-15,并在EC-109细胞中进行了表达;转染后对食管癌细胞生长有促进作用,其表达可能促进食管癌的发生。

关 键 词:食管肿瘤  PEA-15  真核表达载体

Construction and expression of eukaryotic expression vector of PEA-15
Zhang Hongguang,Zhuang Xiaofei,Wang Chunli,Guo Shiping,Ma Yanyan.Construction and expression of eukaryotic expression vector of PEA-15[J].Cancer Research and Clinic,2014(5):298-301.
Authors:Zhang Hongguang  Zhuang Xiaofei  Wang Chunli  Guo Shiping  Ma Yanyan
Affiliation:(Department of Thoracic Surgery, Shanxi Cancer Hospital, Taiyuan 030013, China)
Abstract:
Keywords:Esophageal neoplasms  PEA-15  Eukaryotic expression vector
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