| 热休克蛋白90α在人类肝癌细胞外的表达及其对侵袭、迁移能力的影响 |
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| 作者姓名： | 李卫华 陈广原 余湘文 彭妙官 石永英 卫建筠 |
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| 作者单位： | 广州医学院第一附属医院感染科,510102 |
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| 基金项目： | 基金项目：广东省自然科学基金（9151040701000037）;广州市科技计划（2009J1-C321-2） |
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| 摘 要： | ![]()
目的探讨细胞外热休克蛋白90α（HSP90α参与肝癌细胞转移的可能分子机制。方法采用免疫印迹法检测HSP90α在低、高转移性肝癌MHCC97-L和MHCC97-H细胞外的表达。选取高转移潜能MHCC97-H细胞，应用不穿透细胞膜的小分子抑制剂抑制细胞外HSP90α表达，体外侵袭实验观察细胞侵袭、迁移能力的变化，明胶酶谱法分析基质金属蛋白酶2（MMP-2）活性的改变。免疫印迹和免疫共沉淀法检测细胞外辅助分子伴侣HSP70和MMP-2的表达及其与HSP90d的相互作用。利用RNA干扰技术下调细胞HSP70表达，观察细胞外HSP90仅与MMP-2相互作用及其细胞转移潜能的变化。结果HSP90d在不同转移潜能肝癌细胞内外均表达，且与肝癌细胞转移潜能呈正相关。MHCC97-H细胞经特异性HSP90抑制剂二甲氨基乙氨基-17-去甲氧基格尔德霉素-N-氧化物（DMAG—N—oxide）作用24h后，穿过上室基底膜的细胞数较未处理组和空白对照组明显下降（P〈0．01），分别为（28．11±3．56）、（80．12±4．16）、（82．24±4．12）个。体外侵袭实验显示，穿过Matrigel人工基底膜的细胞数低于未处理组和空白对照组，分别为（36．54±4．12）、（95．12±3．48）、（101．11±3．36）个，差异有统计学意义（P=0．017），并伴有细胞外MMP-2活性减低。HSP70和MMP-2均可在MHCC97-H细胞外表达，且能与HSP90α相互结合。小分子干扰RNA（siRNA）能有效抑制细胞HSP70表达，MHCC97-H细胞外HSP90d和MMP-2相互作用减弱，MMP-2活性下降，细胞侵袭、迁移能力受抑制。同时联合应用MMP-2抑制剂，具有协同抑制效应。结论细胞外HSP90饯可能通过与HSP70形成伴侣复合体介导MMP-2成熟活化，增强肝癌细胞侵袭、迁移运动，提示其可能是潜在的对肝癌转移实施防治的靶点。
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| 关 键 词： | 癌 肝细胞 HSP90热休克蛋白质类 HSP70热休克蛋白质类 基质金属蛋白酶2 肿瘤转移 |
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