反义RNA对培养的肾小管上皮 |
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作者姓名: | 陈永雄 李锦华 余学清 黄凌虹 陈伟英 吕军 范崇伦 尹培达 |
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作者单位: | 1.中山医科大学附属第一医院肾内科 卫生部肾脏病临床研究重点实验室,广东,广州,510089 |
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基金项目: | 卫生部科研基金(No.98-1-090)资助;广东省卫生厅基金(No.A1998147)资助 |
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摘 要: | 目的:探讨骨调素(OPN)反义RNA对培养的肾小管上皮细胞骨调素表达的影响。方法:脂质体介导将表达OPN反义RNA的逆转录病毒重组载体转染大鼠肾小管上皮细胞系NRK52E细胞,建立稳定表达OPN反义RNA的肾小管上皮细胞克隆,以转染了表达OPN顺义RNA和空白逆转录病毒载体的肾小管上皮细胞克隆为对照,以表皮生长因子(EGF)为刺激剂,通过核酸酶保护分析(RPA),WesternBlot,ELISA和OPN生物活性分析检测上述克隆细胞的OPN表达。结果:OPN反义RNA仅被反义克隆细胞表达,反义克隆、顺义克隆和空白克隆细胞均有OPNmRNA的表达,EGF能增加它们OPNmRNA的表达水平,但不增加反义RNA或顺义RNA的表达水平;加或不加EGF的反义克隆细胞和不加EGF的空白克隆细胞无OPN蛋白的表达,加或不加EGF的顺义克隆细胞和加EGF的空白克隆细胞有OPN蛋白的表达。结论:OPN反义RNA能抑制肾小管上皮细胞OPNmRNA的翻译而抑制OPN蛋白的表达,但不抑制OPNmRNA的转录。
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关 键 词: | RNA 反义 肾小管 表皮生长因子-尿抑胃素 |
文章编号: | 1000-4718(2000)11-1153-06 |
收稿时间: | 2000-01-10 |
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