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反义RNA对培养的肾小管上皮
作者姓名:陈永雄  李锦华  余学清  黄凌虹  陈伟英  吕军  范崇伦  尹培达
作者单位:1.中山医科大学附属第一医院肾内科 卫生部肾脏病临床研究重点实验室,广东,广州,510089
基金项目:卫生部科研基金(No.98-1-090)资助;广东省卫生厅基金(No.A1998147)资助
摘    要:目的:探讨骨调素(OPN)反义RNA对培养的肾小管上皮细胞骨调素表达的影响。方法:脂质体介导将表达OPN反义RNA的逆转录病毒重组载体转染大鼠肾小管上皮细胞系NRK52E细胞,建立稳定表达OPN反义RNA的肾小管上皮细胞克隆,以转染了表达OPN顺义RNA和空白逆转录病毒载体的肾小管上皮细胞克隆为对照,以表皮生长因子(EGF)为刺激剂,通过核酸酶保护分析(RPA),WesternBlot,ELISA和OPN生物活性分析检测上述克隆细胞的OPN表达。结果:OPN反义RNA仅被反义克隆细胞表达,反义克隆、顺义克隆和空白克隆细胞均有OPNmRNA的表达,EGF能增加它们OPNmRNA的表达水平,但不增加反义RNA或顺义RNA的表达水平;加或不加EGF的反义克隆细胞和不加EGF的空白克隆细胞无OPN蛋白的表达,加或不加EGF的顺义克隆细胞和加EGF的空白克隆细胞有OPN蛋白的表达。结论:OPN反义RNA能抑制肾小管上皮细胞OPNmRNA的翻译而抑制OPN蛋白的表达,但不抑制OPNmRNA的转录。

关 键 词:RNA   反义  肾小管  表皮生长因子-尿抑胃素  
文章编号:1000-4718(2000)11-1153-06
收稿时间:2000-01-10
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