| siRNA沉默COX-2基因对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、细胞周期、凋亡和成瘤能力的影响 |
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| 作者姓名： | 钟英强 黄花荣 刘娟 林莹 夏忠胜 昝慧 |
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| 作者单位： | 1.中山大学孙逸仙纪念医院消化内科,广东,广州,510120;2.中山大学孙逸仙纪念医院儿科,广东,广州,510120;3.,广东,广州,510006;4.绵阳市第三人民医院消化内科,四川,绵阳,621000 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金资助项目,广东省科技计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:研究siRNA沉默环氧合酶-2(COX-2)基因对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、细胞周期、凋亡和成瘤能力的影响。方法:以Lipofectamine2000(Lipo)为载体转染siRNA-COX-2至Capan-2细胞。应用RT-PCR、realtimePCR检测COX-2-mRNA表达,Westernblotting检测COX-2蛋白的表达。应用细胞直接计数法检测细胞的增殖,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡与周期。应用裸鼠模型评估COX-2-siRNA转染的Capan-2细胞成瘤能力的影响。结果:在siRNA-COX-2浓度为50nmol/L、Lipo为5μL∶2mL转染容积条件下,在Capan-2细胞的转染效率可达96.47%。siRNA-COX-2沉默Capan-2细胞中COX-2基因表达的最佳序列为siRNA006,转染24h以后沉默效率达73%,COX-2蛋白表达水平在转染后48h和72h分别被下调了67%和61%。转染48h后,Capan-2细胞生长明显减慢(P<0.05),48h和72h抑制细胞增殖率分别为35.48%和56.32%。细胞凋亡率较对照组高(P<0.05),48h和72h细胞凋亡率为2.03%和3.27%。转染24h、48h和72hG0/G1期的比例分别是58.03%、63.31%和65.66%,S期的比例分别是30.27%、24.87%和22.2%。siRNA-COX-2转染Capan-2细胞在裸鼠的皮下形成的肿瘤体积和重量明显减少(P<0.05)。结论:siRNA006-COX-2可有效沉默COX-2基因的表达,可明显抑制Capan-2细胞的生长并降低其成瘤能力。
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| 关 键 词： | 胰腺肿瘤 Capan-2细胞 环氧合酶-2 RNA干扰 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期 |
| 收稿时间： | 2011-01-24 |
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