目的 用 Ｉｏｎ Ｔｏｒｒｅｎｔ 半导体测序技术对 １１ 个血友病 Ｂ（ＨＢ）家系的 Ｆ９ 基因进行序列分析，寻找致病突变，并为遗传咨 询和产前诊断提供依据。方法 采集 １１ 个 ＨＢ 家系先证者及女性成员的外周血样本，抽提基因组 ＤＮＡ，利用 Ｉｏｎ Ｔｏｒｒｅｎｔ 半导 体测序技术检测 Ｆ９基因致病突变，对发现的致病突变进行 Ｓａｎｇｅｒ 测序验证。进一步对 ７ 例高危家系孕妇进行羊膜腔穿刺， 采集胎儿羊水样本，并进行产前诊断。结果 １３ 例 ＨＢ 患者均存在 Ｆ９基因致病性突变，共发现 １０ 种突变，其中 １ 种为新的突 变类型。对 ８ 例胎儿进行产前诊断，其中 １ 例为半合子突变，２ 例为杂合突变，５ 例不携带母源致病突变。结论 用 Ｉｏｎ Ｔｏｒｒｅｎｔ 半导体测序技术检测 Ｆ９基因的突变谱，对于 ＨＢ 家系携带者的产前诊断具有一定的临床意义。
Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｆ９ ｇｅｎｅ ｉｎ １１ ｐｅｄｉｇｒｅｅｓ ｗｉｔｈ ｈｅｍｏｐｈｉｌｉａ Ｂ ｂｙ Ｉｏｎ Ｔｏｒｒｅｎｔ ｓｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｅｖｉｄｅｎｃｅｓ ｆｏｒ ｇｅｎｅｔｉｃ ｃｏｕｎｓｅｌｌｉｎｇ ａｎｄ ｐｒｅｎａｔａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｐｒｏｂａｎｄｓ ａｎｄ ｆｅｍａｌｅ ｆａｍｉｌｙ ｍｅｍｂｅｒｓ，ａｎｄ ｇｅｎｏｍｉｃ ＤＮＡ ｗａｓ ｅｘｔｒａｔｃｅｄ ａｎｄ ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ ｔｏ Ｉｏｎ Ｔｏｒｒｅｎｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ａｎａｌｙｓｉｓ ｆｏｒ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｆ９ ｇｅｎｅ． Ｔｈｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ Ｆ９ ｇｅｎｅ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ ｂｙ Ｓａｎｇｅｒ ｓｅ ｑｕｅｎｃｉｎｇ ａｎａｌｙｓｉｓ． Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ａｍｎｉｏｃｅｎｔｅｓｉｓ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｉｎ ７ ｐｒｅｇｎａｎｔ ｗｏｍｅｎ ｆｒｏｍ ｈｉｇｈｒｉｓｋ ｆａｍｉｌｉｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ａｍｎｉｏｔｉｃ ｆｌｕｉｄ ｓａｍ ｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｔｃｅｄ ｆｏｒ ｐｒｅｎａｔａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｉｎ ｔｏｔａｌ，ｗｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ １０ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ Ｆ９ ｇｅｎｅ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｆｒｏｍ １３ ｈｅｍｏｐｈｉｌｉａ Ｂ ｐａ ｔｉｅｎｔｓ，ａｍｏｎｇ ｗｈｉｃｈ ｏｎｅ ｗａｓ ｎｏｖｅｌ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｔｙｐｅ ｔｈａｔ ｈａｄ ｎｏｔ ｂｅｅｎ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｂｅｆｏｒｅ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｔｓ ｏｆ ｐｒｅｎａｔａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｆｏｒ ８ ｏｆ ｔｈｅ ｆｅｔｕｓｅｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｏｎｅ ｆｅｔｕｓ ｗａｓ ｈｅｍｉｚｙｇｏｕｓ ｍｕｔａｔｉｏｎ，ｔｗｏ ｗｅｒｅ ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓ ａｎｄ ｆｉｖｅ ｗｅｒｅ ｗｉｌｄ ｔｙｐｅ ｗｉｔｈｏｕｔ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｆｒｏｍ ｍａｔｅｒ ｎａｌ ｓｏｕｒｃｅ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｉｏｎ Ｔｏｒｒｅｎｔ ｓｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｉｎ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ Ｆ９ ｇｅｎｅ ｓｈｏｗｓ ａ ｃｅｒｔａｉｎ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｅｎａｔａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｈｅｍｏｐｈｉｌｉａ Ｂ ｆａｍｉｌｙ ｃａｒｒｉｅｒｓ． Ｏｕｒ ｓｔｕｄｙ ｎｏｔ ｏｎｌｙ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ｅｖｉｄｅｎｃｅｅｓ ｆｏｒ ｇｅｎｅｔｉｃ ｃｏｕｎ ｓｅｌｌｉｎｇ ａｎｄ ｐｒｅｎａｔａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ｂｕｔ ａｌｓｏ ｅｘｐａｎｄｓ ｔｈｅ ｍｕｔａｔｉｏｎａｌ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ Ｆ９ ｇｅｎｅ．
刘安,马定远,刘刚,林颍,李璃,许争峰,钟天鹰.用 Ion Torrent 半导体测序技术对血友病 B 家系 F9 基因行突变分析及产前诊断[J].临床检验杂志,2021,39(9):641-645